mESF 小鼠ES基礎(chǔ)培養(yǎng)基 / mESF 添加物

mESF基礎(chǔ)培養(yǎng)基/mESF添加物

用于小鼠ES細(xì)胞培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基

　　本產(chǎn)品是用于小鼠ES細(xì)胞培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基。只需在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加mESF 添加物和LIF后即可進(jìn)行小鼠ES細(xì)胞培養(yǎng)。使用時(shí)無需添加 FBS 或血清代替品，同時(shí)無需使用飼養(yǎng)層細(xì)胞。

◆產(chǎn)品

●　mESF基礎(chǔ)培養(yǎng)基（編號No. 136-17805）

●　mESF添加物（編號No. 299-73301）

●　mESF Supplement A 5ml×1
●　mESF Supplement B 5ml×1（含有 0.0078% 2-mercaptoethanol）

◆特點(diǎn)

●　無需FBS 和血清代替品（無血清培養(yǎng)基）

●　無需飼養(yǎng)層細(xì)胞

●　低濃度 LIF 下也能維持未分化能力

◆使用方法

●　往 mESF 基礎(chǔ)培養(yǎng)基全量加入各種 mESF Supplement及LIF。

※注　直接將mESF 從現(xiàn)在使用中的培養(yǎng)基移出時(shí)，成功移植細(xì)胞數(shù)量有可能性減少。因此，請播種比移植時(shí)更多的細(xì)胞。此外，若不擅長直接移植，請按照以下順序進(jìn)行馴化。

　　①播種細(xì)胞時(shí)，將使用中的培養(yǎng)基與mESF 培養(yǎng)基以1：1的比例混合。

　　②在后面的移植階段，將使用中的培養(yǎng)基與mESF 培養(yǎng)基以1：3、 1：7的比例混合，依次增加mESF培養(yǎng)基的用量。

◆小鼠ES細(xì)胞D3細(xì)胞系的培養(yǎng)

　　使用本產(chǎn)品培養(yǎng)小鼠 ES細(xì)胞 D3細(xì)胞系傳代至第５代，觀察到細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞繁殖能力、未分化標(biāo)記物。

◆細(xì)胞形態(tài)

　　觀察到具有小鼠 ES細(xì)胞te有光澤的細(xì)胞集落。

◆細(xì)胞繁殖曲線

　　使用本產(chǎn)品后的繁殖曲線如下圖。

（培養(yǎng)基組成）
　　ｍESF 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 各 mESF Supplement + 1,000units/ml StemSure^® LIF

（細(xì)胞播種數(shù)）

　　7,000 cells/well　

（使用骨膠原蛋白涂層處理12孔板）　

◆觀察到未分化標(biāo)記物

　　各種未分化標(biāo)記物（Nanog, Sox2, Oct3/4, SSEA-1）呈陽性。

 ◆低濃度LIF下的小鼠ES細(xì)胞D3細(xì)胞系培養(yǎng)

　　在低濃度LIF下（250, 500units/ml）培養(yǎng)了小鼠ES細(xì)胞D3細(xì)胞系。

◆集落形態(tài)（ALP染色）?細(xì)胞繁殖曲線

　　細(xì)胞形態(tài)及細(xì)胞繁殖曲線如下圖。 

（培養(yǎng)基組成）

　　ｍESF基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 各mESF Supplement + 250 or 500 or 1,000units/ml StemSure^® LIF

（細(xì)胞播種數(shù)）

　　7,000cells/well　

（使用骨膠原蛋白涂層處理12孔板）　

◆ALP染色陽性集落形成率

　　任何LIF濃度下的集落ALP染色幾乎都呈陽性。