簡要描述：實驗中導(dǎo)致外泌體等細(xì)胞外囊泡（EV: Extracellular Vesicle）減少的原因多種多樣，其中，對樣品管等實驗耗材的吸附是EV損失的主要原因，EV研究的指南《MISEV2023》中也指出，純化后的EV易吸附于儲存容器1）。使用蛋白質(zhì)低吸附管可有效防止EV吸附樣品管2-3），但實驗中使用的塑料制品不止樣品管，還有移液器槍頭和離心管等，要將這些耗材全部替換為低吸附耗材并不容易。
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| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個月 |
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實驗中導(dǎo)致外泌體等細(xì)胞外囊泡（EV: Extracellular Vesicle）減少的原因多種多樣，其中，對樣品管等實驗耗材的吸附是EV損失的主要原因，EV研究的指南《MISEV2023》中也指出，純化后的EV易吸附于儲存容器1）。使用蛋白質(zhì)低吸附管可有效防止EV吸附樣品管2-3），但實驗中使用的塑料制品不止樣品管，還有移液器槍頭和離心管等，要將這些耗材全部替換為低吸附耗材并不容易。
添加保存穩(wěn)定劑至樣品或純化EV溶液中在可操作性和多功能性方面提供了出色的解決方案。FUJIFILM Wako開發(fā)的EV-Save™ 細(xì)胞外囊泡保存穩(wěn)定劑（產(chǎn)品編號：058-09261）僅需添加至樣品或純化EV溶液中，即可抑制樣品管、移液器槍頭和離心管上的吸附。另外，本產(chǎn)品也具有保護(hù)EV免受凍融損傷的作用。FUJIFILM Wako還提供專用于動物給藥和通過TFF純化EV的EV-Save™ 系列產(chǎn)品。
產(chǎn)品陣容
◆EV-Save™ 細(xì)胞外囊泡保存穩(wěn)定試劑（超濾用）
本產(chǎn)品是一款可抑制EV吸附于樣品管或移液槍槍頭等實驗耗材的聚合物試劑。可抑制實驗中以及保存過程中產(chǎn)生的EV損失，從而提高回收率。此外，它還具有保護(hù)EV免受凍融傷害的效果。建議在EV的過濾、純化和保存前添加本產(chǎn)品至樣品中。
特點
● 抑制樣品管和移液器槍頭等的EV吸附
● 保護(hù)EV免受反復(fù)凍融的損傷
● 操作簡便，僅需將EV-Save™（超濾用）直接添加至樣品或純化EV溶液中即可
推薦樣品
● 細(xì)胞培養(yǎng)上清
● 純化EV溶液
※ 在血清、血漿和干擾物質(zhì)含量高的樣品中，難以獲得理想的防吸附效果。
對實驗分析的影響
已確認(rèn)添加EV-Save™不影響以下實驗的外泌體分析：
- Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)
- WB
- ELISA
- 微陣列
- 細(xì)胞培養(yǎng)
※ EV-Save™（超濾用）（產(chǎn)品編號：058-09261）含有聚合物。若聚合物會影響后續(xù)的實驗結(jié)果，請勿使用本產(chǎn)品。
數(shù)據(jù)
▼吸附抑制效果
添加EV-Save™（超濾用）至使用PS親和法純化的COLO201細(xì)胞來源EV，靜置3 min。然后，移至新的樣品管中，重復(fù)本步驟。使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD)檢測樣品管內(nèi)的EV含量（CD63信號）。 【結(jié)果】 將樣品移至新樣品管時，CD63的信號減弱。但通過添加了EV-Save™（超濾用）幾乎wan全抑制移液引起的信號減弱。 |
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▼冷凍保護(hù)效果
添加EV-Save™（超濾用）至使用PS親和法純化的COLO201細(xì)胞來源EV后進(jìn)行凍融。使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD)檢測樣品管內(nèi)的EV含量（CD63信號），使用透射電子顯微鏡分析EV的形態(tài)。
（1）ELISA | （2）電子顯微鏡 |
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【結(jié)果】 未添加EV-Save™（超濾用）的樣品凍融后，CD63信號減弱。但通過添加EV-Save™（超濾用）可抑制凍融引起的信號減弱。電子顯微鏡下也可以觀察EV-Save™（超濾用）抑制了粒子數(shù)的減少。 | |
◆EV-Save™ 細(xì)胞外囊泡保存穩(wěn)定劑（in vivo 用）
本產(chǎn)品的組成成分僅使用具有藥物添加劑實例的成分，是一款可用于EV給藥實驗動物的EV吸附抑制劑和冷凍保護(hù)劑。
特點
● 抑制樣品管和移液器槍頭等的EV吸附
● 保護(hù)EV免受反復(fù)凍融的損傷
● 操作簡便，僅需將EV-Save™直接添加至樣品或純化EV溶液中即可
● 組成成分使用可排出體外的分子量以及具有藥物添加劑實例的成分
推薦樣品
● 細(xì)胞培養(yǎng)上清
● 純化EV溶液
※ 在血清、血漿和干擾物質(zhì)含量高的樣品中，難以獲得理想的抗吸附效果
對實驗分析的影響
已確認(rèn)添加EV-Save™不影響以下實驗分析的外泌體分析：
- Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)
- WB
- ELISA
- 微陣列
- 細(xì)胞培養(yǎng)
※ 超濾時請選擇EV-Save™（超濾用）（產(chǎn)品編號：058-09261）
數(shù)據(jù)
▼吸附抑制效果
添加EV-Save™（超濾用）和EV-Save™（in vivo 用）至PS親和法純化的COLO201細(xì)胞來源外泌體，在4℃下存儲16 h。然后使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)檢測樣品管內(nèi)的CD9信號。
【結(jié)果】 未添加EV-Save™的樣品中，CD9信號減弱，但添加了EV-Save™（超濾用）和EV-Save™（in vivo 用）的樣品后可抑制信號減弱。 |
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▼冷凍保護(hù)效果
添加EV-Save™（超濾用）和EV-Save™（in vivo 用）至PS親和法純化COLO201細(xì)胞來源EV，反復(fù)凍融1或3次。使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)檢測樣品管內(nèi)的EV含量（CD9信號）。
【結(jié)果】 未添加EV-Save™的樣品中，凍融后CD9信號減弱。但添加EV-Save™（超濾用）和EV-Save™（in vivo 用）后可抑制信號減弱。 |
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◆EV-Save™ 細(xì)胞外囊泡保存穩(wěn)定劑（TFF用）
切向流過濾法（TFF）作為一種高效的方法被用于細(xì)胞外囊泡（EV）濃縮和緩沖液置換。TFF通過將樣品與濾膜平行流動來防止樣品在濾膜上堆積，盡可能地減少樣品損失。另外，EV等易吸附的樣品由于膜吸附和過濾操作中的物理應(yīng)力，回收率可能會降低。
本產(chǎn)品旨在通過減輕TFF處理過程中的物理應(yīng)力以及膜的吸附來提高EV回收率。使用本產(chǎn)品可實現(xiàn)高效、穩(wěn)定的EV回收。
特點
● 抑制使用TFF進(jìn)行EV純化、濃縮和緩沖液置換過程中的EV損傷和EV對濾膜的吸附
● 操作簡便，僅需向樣品添加本產(chǎn)品和平衡緩沖液
● 本產(chǎn)品可防止因吸附于試管而導(dǎo)致的EV損失，并防止凍融損傷，過濾后(TFF)的EV溶液可以直接保存。
（注：僅在緩沖液交換過程中添加本產(chǎn)品才能達(dá)到此效果）
推薦樣品
● 純化的EV
● 細(xì)胞培養(yǎng)上清
※ 在血清、血漿和雜志含量高的樣品中，難以獲得理想的防吸附效果。
性能數(shù)據(jù)
▼提高緩沖液置換過程中純化的 EV 的回收率
使用MassivEV™ EV Purification Column PS（產(chǎn)品編號：131-19491）從骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞（BMMSC）和脂肪組織來源間充質(zhì)干細(xì)胞（ADMSC）的細(xì)胞培養(yǎng)上清中純化EV。然后，使用Repligen的TFF系統(tǒng)，更換添加了本產(chǎn)品1/100量的HBS 緩沖液進(jìn)行緩沖液交換。使用PS Capture™ 外泌體ELISA試劑盒（鏈霉親和素HRP）（產(chǎn)品編號：298-80601，檢測抗體使用抗CD63或抗CD81抗體），評估緩沖液置換后的EV回收率。，EV粒子粒徑分布則使用Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)進(jìn)行檢測。
（1）ELISA
【結(jié)果】
通過添加本產(chǎn)品，可以觀察到基于TFF置換緩沖液中EV的回收率升高。
（2）NTA
【結(jié)果】
添加本產(chǎn)品后，純化EV粒子粒徑分布并未觀察到明顯變化。
▼提高基于TFF從細(xì)胞培養(yǎng)上清中純化EV的回收率
使用TFF將細(xì)胞培養(yǎng)上清濃縮20倍，然后用100倍的緩沖液進(jìn)行置換。將本品以1/100的量添加至細(xì)胞培養(yǎng)上清液和置換緩沖液中。使用CD63和CD81的ELISA試劑盒檢測EV的回收率，使用Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)檢測EV粒子粒徑分布。
(1) ELISA
【結(jié)果】
通過添加本產(chǎn)品，可以觀察到從細(xì)胞上清中純化EV的回收率有所提升。
(2) NTA
【結(jié)果】
添加本產(chǎn)品后， EV的粒子粒徑分布并未觀察到明顯變化。
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| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 058-09261 | EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent EV-Save™ 細(xì)胞外囊泡保存穩(wěn)定劑（超濾用） | 1 mL | 基因研究用 | - |
| 050-09461 | EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent for in vivo EV-Save™ 細(xì)胞外囊泡保存穩(wěn)定劑（動物體內(nèi)實驗用） | 1 mL | 基因研究用 | - |
| 059-09671 | EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent for TFF EV-Save™ 細(xì)胞外囊泡保存穩(wěn)定劑（TFF用） | 20 mL | 基因研究用 | - |
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 294-84101 | MagCapture(TM) Exosome Isolation Kit PS Ver.2 MagCapture™外泌體提取試劑盒PS Ver.2 | 2 Tests | 基因研究用 | - |
| 290-84103 | MagCapture(TM) Exosome Isolation Kit PS Ver.2 MagCapture™外泌體提取試劑盒PS Ver.2 | 10 Tests | 基因研究用 | - |
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 293-96401 | MagCapture (TM) EV Isolation Kit PS for HTS HTS用MagCapture™ EV提取試劑盒PS | 96 Tests | 基因研究用 | - |
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 131-19491 | MassivEV™ EV Purification Column PS MassivEV™ 細(xì)胞外囊泡（EV）純化分離柱 PS | 1 mL | 基因研究用 | - |
| 137-19493 | MassivEV™ EV Purification Column PS MassivEV™ 細(xì)胞外囊泡（EV）純化分離柱 PS | 5 mL | 基因研究用 | - |
| 295-96601 | MassivEV™ Purification Buffer Set MassivEV™ 細(xì)胞外囊泡（EV）純化緩沖液套裝 | 1mL×10回用(5mL×2回用) | 基因研究用 | - |
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 294-84601 | microRNA Extractor(R) Kit for Purified EV 純化細(xì)胞外囊泡（EV）用miRNA提取試劑盒 | 20 Tests | 基因研究用 | - |
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 297-79201 | PS Capture(TM) Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD) PS Capture™外泌體ELISA試劑盒（抗小鼠IgG POD） | 96 Tests | 基因研究用 | - |
| 298-80601 | PS Capture(TM) Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) PS Capture™外泌體ELISA Kit （鏈霉親和素HRP） | 96 Tests | 基因研究用 | - |
| 296-83701 | CD9-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD9-Capture 人外泌體ELISA試劑盒（鏈霉親和素HRP） | 96 Tests | 基因研究用 | - |
| 290-83601 | CD63-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD63-Capture 人外泌體ELISA試劑盒（鏈霉親和素HRP） | 96 Tests | 基因研究用 | - |
| 292-83801 | CD81-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD81-Capture 人外泌體ELISA試劑盒（鏈霉親和素HRP） | 96 Tests | 基因研究用 | - |
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 297-79701 | PS Capture™ Exosome Flow Cytometry Kit PS Capture™外泌體流式試劑盒 | 300 Tests | 基因研究用 | - |
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 014-27763 | Anti CD9, Monoclonal Antibody (1K) 抗CD9單克隆抗體（1K） | 100 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
| 013-27951 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody (30B) , Biotin Conjugated | 20 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
| 019-27953 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody (30B) , Biotin Conjugated | 100 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
| 013-28171 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody(77B) | 20 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
| 019-28173 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody(77B) | 100 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
| 017-28211 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody(77B), Biotin-conjugated | 50 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
| 012-27063 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13) 抗CD63單抗（3-13） | 100 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
| 019-27713 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13), Biotin Conjugated 抗CD63單克隆抗體（3-13），sheng物素偶聯(lián) | 100 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
| 014-27643 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13), Fluorescein Conjugated 抗CD63，單克隆抗體（3-13），熒光素結(jié)合 | 100 Tests | 免疫化學(xué)用 | - |
| 011-27751 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13), Red Fluorochrome(635) Conjugated 抗CD63單克隆抗體（3-13），紅色熒光染料（635）偶聯(lián) | 25 Tests | 免疫化學(xué)用 | - |
| 017-27753 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13), Red Fluorochrome(635) Conjugated 抗CD63單克隆抗體（3-13），紅色熒光染料（635）偶聯(lián) | 100 Tests | 免疫化學(xué)用 | - |
| 011-27773 | Anti CD81, Monoclonal Antibody (17B1) 抗CD81單克隆抗體（17B1） | 100 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
| 014-28221 | Anti CD81, Rat Monoclonal Antibody(9B) | 20 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
| 010-28223 | Anti CD81, Rat Monoclonal Antibody(9B) | 100 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
| 011-28111 | Anti CD81, Rat Monoclonal Antibody (9B), Biotin-conjugated | 50 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 343-09661 | ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 外泌體膜染色熒光試劑盒（Green） | 5 samples | 基因研究用 | - |
| 340-09671 | ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 外泌體膜染色熒光試劑盒（Red） | 5 samples | 基因研究用 | - |
| 347-09681 | ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red 外泌體膜染色熒光試劑盒（Deep Red） | 5 samples | 基因研究用 | - |
| 344-09691 | ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 外泌體蛋白質(zhì)熒光染色試劑盒（Green） | 5 samples | 基因研究用 | - |
| 347-09701 | ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red 外泌體蛋白質(zhì)熒光染色試劑盒（Red） | 5 samples | 基因研究用 | - |
| 344-09711 | ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Deep Red 外泌體蛋白質(zhì)熒光染色試劑盒（Deep Red） | 5 samples | 基因研究用 | - |
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 052-09301 | Exosomes, from COLO201 cells, purified COLO201來源外泌體（已純化） | 50 μL | 基因研究用 | - |
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 132-19345 | MSCultureTM High Growth Basal Medium MSCulture™ 生長用基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500 mL | 細(xì)胞培養(yǎng)用 | - |
| 133-19331 | MSCultureTM High Growth Supplement MSCulture™ 生長用補(bǔ)充劑 | 5 mL | 細(xì)胞培養(yǎng)用 | - |
| 053-09451 | EV-Up(TM) EV Production Basal Medium for MSC, AF EV-Up™ 間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體生產(chǎn)用基礎(chǔ)培養(yǎng)基，無動物源成分 | 95 mL | 細(xì)胞培養(yǎng)用 | - |
| 298-84001 | EV-Up(TM) MSC EV Production Supplement, AF EV-Up™ 間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體生產(chǎn)用添加劑，無動物源成分 | 100 mL用 | 細(xì)胞培養(yǎng)用 | - |
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