詳細(xì)介紹下ips干細(xì)胞培養(yǎng)基的具體成分
更新時(shí)間：2026-03-10
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iPS干細(xì)胞培養(yǎng)基是維持細(xì)胞未分化、高增殖、多能性的核心體系，成分可分為基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)、血清/替代物、生長(zhǎng)因子、抗氧化/代謝補(bǔ)充、抗污染、小分子調(diào)節(jié)劑六大類，不同配方（傳統(tǒng)飼養(yǎng)層、無(wú)血清、化學(xué)成分明確）差異顯著。
一、基礎(chǔ)培養(yǎng)基（核心營(yíng)養(yǎng)骨架）
提供細(xì)胞生存必需的碳源、氮源、維生素、無(wú)機(jī)鹽與緩沖體系，主流為：
DMEM/F12：很常用，含高葡萄糖、平衡鹽、多種維生素，pH穩(wěn)定（7.2–7.4），滲透壓約340mOsm。
KnockOutDMEM：專為干細(xì)胞優(yōu)化，低滲透壓、低鈣，適配血清替代物（KSR）。
基礎(chǔ)成分：葡萄糖（4.5g/L）、NaCl、KCl、NaHCO?、CaCl?、MgSO?、酚紅（pH指示劑）、水溶性維生素（B族、葉酸、煙酰胺）。
二、血清/血清替代物（生長(zhǎng)與黏附支持）
1.傳統(tǒng)含血清配方（飼養(yǎng)層培養(yǎng)）
胎牛血清（FBS）：10%–20%，含生長(zhǎng)因子、黏附蛋白、激素；但批次差異大、有動(dòng)物源污染風(fēng)險(xiǎn)。
替代方案：KnockOutSerumReplacement（KSR），20%，化學(xué)成分明確、無(wú)動(dòng)物源，是iPS主流選擇。
2.無(wú)血清/化學(xué)成分明確配方（如Essential8/E8）
不含血清，用重組蛋白+小分子替代：胰島素（19.4mg/L）、轉(zhuǎn)鐵蛋白（10.7mg/L）、亞硒酸鈉（14μg/L），提供鐵代謝、抗氧化與能量支持。
三、關(guān)鍵生長(zhǎng)因子（維持多能性的核心）
bFGF（FGF2）：必需核心因子，終濃度4–100ng/mL（常用20ng/mL），激活FGFR通路，抑制分化、促增殖。
TGFβ1/Nodal：E8等無(wú)血清配方添加（2μg/LTGFβ1），協(xié)同bFGF維持未分化狀態(tài)。
LIF（白血病抑制因子）：小鼠iPS專用（12.5ng/mL），人iPS通常不依賴。
四、代謝與抗氧化補(bǔ)充劑
L-谷氨酰胺（GlutaMAX）：2mM，細(xì)胞能量與蛋白合成必需，易降解，建議用穩(wěn)定型替代物。
非必需氨基酸（NEAA）：1×，補(bǔ)充丙氨酸、天冬氨酸等，減輕細(xì)胞合成負(fù)擔(dān)。
β-巰基乙醇（2-ME）：100μM，抗氧化，保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激，促存活。
抗壞血酸-2-磷酸鎂：64mg/L，E8配方添加，抗氧化、促膠原合成。
五、抗污染與輔助成分
雙抗（Pen/Strep）：青霉素100U/mL+鏈霉素100μg/mL，抑制細(xì)菌污染（科研常用，臨床級(jí)多不加）。
兩性霉素B：可選，抗真菌。
BSA（牛血清白蛋白）：0.1%–1%，保護(hù)生長(zhǎng)因子、減少細(xì)胞貼壁損傷。
六、小分子調(diào)節(jié)劑（提升存活與克隆效率）
ROCK抑制劑（Y-27632）：傳代/單細(xì)胞接種時(shí)用（10μM），抑制凋亡、大幅提高克隆形成率。
其他：如CHIR99021（GSK3抑制劑）、PD0325901（MEK抑制劑），用于特定多能性維持體系。
